해양 병원성 박테리아 검출 방법, 및 이를 위한 프라이머-프로브 세트, 조성물 및 키트

Abstract

본 발명은 해양 병원성 박테리아 검출 방법, 및 이를 위한 프라이머-프로브 세트, 조성물 및 키트에 관한 것으로, 구체적으로 a) 시료로부터 DNA를 분리하는 단계 b) 상기 분리된 DNA를 주형으로 하고, 서열번호 1의 서열로 이루어지는 정방향 프라이머 서열번호 2의 서열로 이루어지는 역방향 프라이머 및 서열번호 3의 서열 중 32번 염기가 비염기 형태로 치환된 서열로 이루어지는 프로브 를 사용하거나, 서열번호 4의 서열로 이루어지는 정방향 프라이머 서열번호 5의 서열로 이루어지는 역방향 프라이머 및 서열번호 6의 서열 중 30번 염기가 비염기 형태로 치환된 서열로 이루어지는 프로브 를 사용하여 엔도뉴클레아제의 존 재 하에서 재조합효소 중합효소 증폭을 수행하는 단계 및 c) 상기 재조합효소 중합효소 증폭으로 생성된 증폭산물 중 상기 역방향 프라이머 및 상기 프로브의 5‘ 부위가 포함된 증폭산물을 검출하는 단계 를 포 함하는 해양 병원성 박테리아 검출 방법, 및 상기 프라이머 및 프로브를 포함하는 프라이머-프로브 세트, 조성물 및 키트에 관한 것이다. 본 발명에 따르면 재조합효소 중합효소 증폭법을 사용하여 간단하고 신속하며 높은 정확도로 IMO-규제 해 양 병원성 박테리아인 비브리오 콜레라, 엔테로코커스 페칼리스 또는 엔테로코커스 패시움을 검출할 수 있 다. 특히, 본 발명의 검출 방법, 프라이머-프로브 세트, 조성물, 키트는 측면흐름분석법에 적용할 수 있 어 검출의 편의성을 더욱 높일 수 있다. 이에 따라 본 발명의 검출 방법, 프라이머-프로브 세트, 조성물 및 키트는 IMO-규제 해양 병원성 박테리아의 해양 오염 및 확산, 특히 밸러스트수로 인한 오염 및 확산을