해양 자유생활형 선충류 Enoplolaimus sp.(Enoplida: Thoracostomopsidae)와 Bathylaimus sp. (Enoplida:Tripyloididae)의 배양용 적합배지 선정 및 초기 생활사 연구

Abstract

실험실 내에서의 해양 선충류 최적 배양 조건을 찾기 위해 한천배지로 다양한 배지를 제작하여 선충류를 대상으로 한 연구를 수행하였다. 선충류 채집은 태안 만리포 조간대 중 하부의 사질 퇴적물 표층에서부터 약 5 cm의 퇴적물에서 이루어졌다. 배양에 이용한 한천 배지는 Killian 배지의 조성을 다소 변형하고, 한천 농도에 차이를 두었으며, 이 한천배지들을 직경 60 mm 페트리디쉬에 배지 높이가 2.0 mm가 되도록 분주하였다. 선충류의 먹이 생물로서 순수 배양한 미생물 5종을 혼합하여 각각의 배지에 첨가하였다. 각 배지에 Enoplolaimus sp. 5개체를 접종하여 20°C , 암배양으로 설정된 배양기 내에서 배양하였다. Enoplolaimus sp.에 대하여 여러 조건의 실험을 반복 수행한 결과, Killian 배지에 소고기 육즙만을 첨가한 배지의 한천농도 1.0%에서 평균 생존시간이 246.8시간으로 가장 높은 생존율을 나타냈다. 가장 낮은 생존시간은 Killian 배지에 bacto peptone과 소고기 육즙(beef extract)을 첨가한 한천농도 0.4%의 먹이 공급을 한 배지에서 평균 27.6시간으로 가장 낮은 생존시간을 나타냈다. Bathylaimus sp.는 Killian 배지 한천농도 1.0%의 먹이 공급을 하지 않은 배지에서 가장 높은 생존시간을 나타내었고, 산란량과 부화율 실험에서는 평균 7개의 알을 산란하였으며 평균 99.5시간 후에 94.7%의 부화율을 보이는 결과를 나타냈다

In order to find the optimum culture condition for marine free-living nematoda in the laboratory, various agar media were developed and experiments were carried on nematodes. Nematodes have collected from the bottom of the sandy sediments' surface layer (about 5cm sediment) of Taean Mallipo beach's intertidal zone. Especially, with regard to agar medium, Killian medium was transformed slightly, density of agar had made a difference and this agar medium(height 2.0 mm on diameter 60 mm Petri dish) was divided. It was mixed with 5 different species of microorganism as nematodes' live food and added each culture medium. Five individuals of Enoplolaimus sp. on each culture medium were grown in a culture medium which was set on 20°C and light blocked. Moreover, as a result of the optimum culture condition, 1.0% density of agar showed the highest survival rates (the average time of survival is 246.8 hours). On the other hand, the 0.4% density of agar adding Killian medium, bacto peptone and beef extract showed the lowest survival rates, which indicates the average time of survival is 27.6 hours. About Bathylaimus sp., on Killian medium's 1.0% density of agar(no feeding amount) showed the highest survival rates, which connects that the hatching rate 94.7% after 99.5 hours and it laid 7 eggs averagely on the spawning amount and the hatching rate experiment.