꾹저구(Chaenogobius annularis)의 난황단백질에 대한 다클론 항체와 단클론 항체를 이용한 Vitellogenin ELISA System KCI OTHER

Title
꾹저구(Chaenogobius annularis)의 난황단백질에 대한 다클론 항체와 단클론 항체를 이용한 Vitellogenin ELISA System
Alternative Title
Vitellogenin ELISA System Based on Monoclonal and Polyclonal Antibodies against Vitellin of Floating Goby(Chaenogobius annularis)
Author(s)
강봉정; 정지현; 김명희; 한창희; 이재용
KIOST Author(s)
Jung, Jee Hyun(정지현)
Publication Year
2005-12
Abstract
Vitellogenins(VTGs) are the precursor of egg-yolk proteins in most oviparous species from invertebrates to vertebrates. In oviparose vertebrates, VTGs are synthesized in the liver and transported through the blood to oocytes. In female fish, concentrations of plasma VTG increase rapidly at onset of vitellogenesis in the normal reproductive cycle. Male fishes also possess the gene for VTG, but plasma concentrations of the protein typically remain small, presumably due to low levels of endogenous estrogens. However, exposure of males to exogenous estrogenic mimics can result elevated. Therefore, the VTG in fish can be used as a useful biomarker for appropriate tools of endocrine disrupting compounds effects. In this studies, we prepared the test methods that can measure the plasma VTG level in the gobies that live in polluted area with mimic estrogen. For the purpose, we purified VTG of floating goby(Chaenogobius annularis) and prepared specific monoclonal and polyclonal antisera to yolk protein, then developed a sandwich competitive ELISA system for measurement of plasma VTG levels. Validation for the ELISA system using monoclonal and polyclonal antibodies against VTG was tested. The absorbance curve of serial dilutions of serum from vitellogenic female was paralleled to the standard curve of VTG, but normal male was not paralleled. The developed sandwich ELISA system was measured for VTG levels in plasma of common goby(Acanthogobius flaviman) and javeline goby(A. hasta) as well as in plasma of floating goby(C. annularis).

무척추동물에서 척추동물에 이르기까지 대부분의 난생동물들의 난황 단백질의 전구체를 vitellogenin(VTG)이라 한다. 난생 척추동물에서 VTG는 간에서 합성되어 혈액을 통해 난세포로 전이된다. 암컷 어류는 정상적인 생식주기에서 난황단백전구체 형성이 시작되면 혈중 농도는 급격히 증가하게 된다. 수컷도 VTG의 유전자를 가지고 있기 때문에 낮은 수준의 내인성 에스트로겐으로 아주 적은 양의 단백질이 있을 수 있다. 그렇지만 수컷에 외인성 에스트로겐 유사물질에 노출되면 그 양은 증가하게 된다. 따라서 어류에서 VTG는 내분비계 장애물질 효과를 조사하는 유용한 생물학적 추적자로 사용할 수 있다. 이 연구에서는 에스트로겐 유사물질에 오염된 지역에 서식하는 망둑어류의 혈중 VTG의 수준을 정량할 수 있는 방법을 제공하고자 한다. 이러한 목적을 위해 꾹저구(Chaenogobius annularis)의 VTG를 분리하고, 이에 대한 단클론 항체와 다클론 항체를 제작하여 혈중 VTG 수준을 정량할 수 있는 sandwich 경합 ELISA system을 만들었다. 난황단백질에 대한 단클론 항체와 다클론 항체를 사용한 ELISA system에 대한 타당성 검토를 하였다. 순차적으로 희석한 암컷의 혈청에 대한 흡광도 곡선은 VTG 표준농도의 곡선과 평행하였으나 수컷의 혈청에 대한 흡광도 곡선은 평행하지 않았다. 이 VTG에 대한 sandwich ELISA system으로 꾹저구(C. annularis)의 혈중 VTG의 수준을 정량뿐만 아니라 문절망둑(Acanthogobius flaviman)과 풀망둑(A. hasta)의 혈중 VTG 수준을 정량할 수 있다.
ISSN
2465-9525
URI
https://sciwatch.kiost.ac.kr/handle/2020.kiost/4997
Bibliographic Citation
발생과 생식, v.9, no.2, pp.135 - 142, 2005
Publisher
한국발생생물학회
Keywords
Vitellogenin; Floating goby; Monoclonal antibody; Polyclonal antibody
Type
Article
Publisher
한국발생생물학회
Related Researcher
Research Interests

Toxicology,Fish physiology,Marine environment risk assessment,독성학,어류생리학,해양환경 위해성평가

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