USCG Phase II 선박평형수 성능 평가를 위한 해양 바이러스 생사판별 방법 개발

Abstract

본 연구는 향후 보다 강화될 것으로 예측되어지는 USCG Phase II 바이러스 분야 형식승인시험을 대비하기 위해 SYBR Green I과 SYBR Gold의 염색 효율을 비교한 후 염색 효율이 높은 시약을 실제 선박평형수 처리장치(electrolysis type, UV + electrolysis type)를 통과한 처리수에 적용해서 다양한 염분(해수, 담수, 기수) 조건에서 USCG Phase II 시험 적용 가능성을 확인해 보고자 하였다. 염색 효율은 시료의 부피가 0.5 mL ∼ 2 mL, 염색 시약(Stock solution)을 100배 및 200배 희석한 조건에서 가장 선명하게 관찰되는 것으로 확인되었다. SYBR Green I과 SYBR Gold의 염색효율은 장목한 해수조건의 실험구에서 유의한 차이를 보이지 않았지만, SYBR Gold의 노란색에 비해 SYBR Green I으로 염색한 시료에서 발현하는 녹색 형광이 보다 선명해서 관찰이 용이한 것으로 확인 되었다. 선박평형수처리장치(electrolysis type, UV + electrolysis type)를 통과하지 않은 실험수 및 대조수에서의 해양 바이러스 현존량은 약 109~1010 VLP 100 mL-1 으로 확인된 반면, 처리수에서는 살아 있는 바이러스가 관찰되지 않았다. 실험수 결과를 보면, SYBR Green I은 염분 농도와 무관하게 효과적으로 염색이 되는 것으로 확인되었다. 다양한 선박평형수처리기술에 따른 추가적인 검증 및 염색 방법 개발이 필요하지만, SYBR Green I 염색법은 USCG Phase II 규제 발표 시 해양 바이러스 생산판별에 좋은 대안이 될 수 있을 것으로 판단된다.